日韩AV无码久久一区二区,农村熟女XXXXHD做受,精品少妇人妻AV免费久久久,无码人妻丰满熟妇精品区

您好,歡迎進(jìn)入研域(上海)化學(xué)試劑有限公司網(wǎng)站!
一鍵分享網(wǎng)站到:
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    發(fā)布時間: 2011-10-24  點擊次數(shù): 3080次

    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    HRP分子中與酶活性無關(guān)的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發(fā)生自身偶聯(lián),在標(biāo)記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結(jié)合反應(yīng)后,再加入硼氫化鈉還原成穩(wěn)定的結(jié)合物。

    (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸鹽緩沖液1ml中,加入1%DNFB無水乙醇溶液0.1ml,室溫下輕微攪拌1h;
    (2) 加入新鮮配置的0.1mol/L NaIO4 0.5ml,此時溶液由原棕色變?yōu)槟G色,置4℃放置30min,此時溶液由原棕色變?yōu)槟G色;
    (3) 加入2.5%乙二醇1ml, 室溫下輕微攪拌1h,終止反應(yīng);
    (4) 加入待標(biāo)記的抗體5-10mg, 用1.0mol/L, pH9.5 CBS,調(diào)節(jié)pH值至9.0;
    (5) 混勻,置4℃過夜改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體
    (6) 加入硼氫化鈉溶液0.1ml,混勻,4℃放置3h;
    (7) 對0.01mol/L,pH7.4 PBS,4℃透析過夜,換液3次;
    (8) 3000r/min離心30min,去除沉淀物;
    (9) 收集上清液即為酶標(biāo)記抗體。

    【注意事項】
    (1) 在氧化HRP時,以pH5.6醋酸鹽緩沖液溶解酶為宜。
    (2) 一般認(rèn)為氧化HRP 5mg, NaIO4量以0.06mol/L 0.5ml為宜,不能低于0.015mol/L 0.5ml。
    (3) 氧化HRP時間以15-30min為宜。
    (4) 加入DNFB的目的是為了封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。
    (5) 加入乙二醇的目的是終止反應(yīng);為便于在加入抗體后調(diào)pH值,故乙二醇要用0.05mol/L CBS配制。
    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體
     

產(chǎn)品中心 Products
在線客服 聯(lián)系方式

服務(wù)熱線

021-54479081
021-54461587

亚洲AV久久无码精品影视| 国产69TV精品久久久久99| 国产一精品一av一免费爽爽| 国产精品一区二区| 最近韩国日本免费高清观看直播| 欧美又大又粗AAA片免费看| 人善交ZZZZXXXXX另类| 国产麻传媒精品国产AV| 99精品人妻少妇一区二区| 中文字幕热久久久久久久| 国产精品99久久久久久人| 久久亚洲精品无码| 我的漂亮女房东完整版在线| 最近2019中文字幕第一页视频| 成人DVD碟片| 肉妇春潮干柴烈火MYFDUCC| 免费一对一真人视频APP | 亚洲国产精品ⅤA在线观看| 校园H学长含着粉嫩小奶 | 亚洲AV无码乱码国产麻豆| 车子一晃一晃的就进去D乚| 一本一道久久A久久精品综合蜜桃| 野花日本HD免费高清版7| 日本熟妇乱人伦XXXX| 少妇厨房愉情理伦BD在线观看| 揉捏小核鞭打花唇夹子| 嗯啊灬别停啊灬用力灬快| 无码成人性爽XO视频在线观看| 韩国v欧美v亚洲v日本v| 亚洲AV无码一区二区三区人| 被男狂揉吃奶胸60分钟视频| 宝贝乖女你的奶真大水真多小芳| ZLJZLJZLJ日本人水多多| 农村艳妇疯狂做爰| 欧美老熟妇XB水多毛多| 久久AV无码精品人妻出轨| AV在线免费观看| 刺激VIDEOSCHINA偷拍| 曰韩无码二三区中文字幕| 小舞屈辱打开双腿自慰出白浆| 日日摸日日踫夜夜爽无码久久 |